Optimización de una técnica de medida de disrupción endocrina por medio de Saccharomyces cerevisiae recombinantes
DOI:
https://doi.org/10.26461/05.05Abstract
Endocrine disruptors are exogenous chemical substances to the organism, capable of altering the homeostasis of the endocrine- reproductive system. A group of these, estrogenic compounds, may cause negative effects on reproductive capacity of some fish, decreasing fertility, sexual ability, sperm production and feminization of males. This paper describes the analytical performance of a method for the quantitation of estrogenicity in water. The technique used was the Yeast Estrogen Screen (YES) with recombinant Saccharomyces cerevisiae, a genetically modified yeast with human estrogen receptor expression and a plasmid with the lacZ reporter gene under the control of estrogen response elements. The gene coding for β-galactosidase, which is secreted to the medium catalyzes the metabolism of a chromogenic substrate, showing a color change measure to 420 nm. The standard 17 β-estradiol was used to build a calibration curve in the range of concentrations between 1.75 ng/l and 7.5 μg/l. Sigmoid curves of dose - response obtained were fitted by the Hill function and r 2 was greater than 0.95. The method detection limit is 55 ng/l. The analyzed samples showed no detectable estrogenicity.Downloads
References
ARNOLD, S.; COLLINS, B.; ROBINSON, M.; GUILLETTE, L.; MCLACHLAN J. Differential interaction of natural and synthetic estrogens with extracellular binding proteins in a yeast estrogen screen. En: Steroids. 1996, 61(11):642–646.
BIALES, A.; BENCIC, D.; FLICK, R.; LAZORCHAK, J.; LATTIER, D. Quantification and associated variability of induced vitellogenin gene transcripts in fathead minnow (Pimefales promelas) by quantitative real-time polymerase chain reaction assay. En: Environmental Toxicology and Chemistry. 2007, 26(2):287–296.
BUCKLEY, J. Quantifying the antiestrogen activity of wastewater treatment plant effluent using the yeast estrogen screen. En: Environmental Toxicology and Chemistry. 2010, 29:73–78.
CONROY, O.; QUANRUD, D.; ELA, W.; WICKE, D.; LANSEY, K. Y ARNOLD, R. Fate of wastewater hER-agonists and h-ER antagonists during soil aquifer treatment. En: Environmental Toxicology and Chemistry. 2005, 39:2287–2293.
DE BOEVER, P.; PIETERS, G.; SICILIANO, S.; D’HOOGE, W.; VERSTRAET, W. Optimization of a yeast estrogen screen and its applicability to study the release of estrogenic isoflavones from a soygerm powder. En: Environmental Health Perspectives. 2001, 109(7):691-697.
CANADA. ENVIRONMENT CANADA. Guidance document on statistical methods for environmental toxicity test. Ottawa: Environment Canada, 2007. (Environmental Protection Series; 1/RM/46)
GAIDO, K.; LEONEL, L.; LOVELL, S.; GOULD, J.; BABAI, D.; PORTIER, C.; MCDONNELL, D. Evaluation of chemicals with endocrine modulating activity in a yeast-based steroid hormone receptor gene transcription assay. En: Toxicology and Applied Pharmacology. 1997, 143(1):205–212.
JOBLING, S.; COEY, S.; WHITMORE, J. G.; KIME, D. E.; VAN LOOK, K.J.W.; MCALLISTER, B.G.; BERESFORD, N.; HENSHAW, A.C.; BRIGHTY, G.; TYLER, C.R.; SUMPTER, J. P. Wild intersex roach (Rutilus rutilus) have reduced fertility. En: Biology of Reproduction. 2002, 67(2):515–524.
KRISTENSEN, T.; BAATRUP, E.; BAYLEY, M. 17β Ethinylestradiol reduces the competitive reproductive fitness of the male guppy (Poecilia reticulata). En: Biology of Reproduction.2005, 72(1):150–156.
LANGE, R.; HUTCHINSON, T.; CROUDACE, C.; SIEGMUND, F.; SCHWEINFURTH, H.; HAMPE, P.; PANTER, G.; SUMPTER, J. Effects of the synthetic estrogen 17 α ethinylestradiol on the life-cycle of the fathead minnow (Pimephales promelas). En: Environmental Toxicolgyand Chemistry. 2001, 20(6):2001–2012.
LORENZEN, A.; HENDEL, J.; CONN, K.; BITTMAN, S.; KWABIAH, A.; LAZAROVITZ, G.; MASSÉ, D.; MCALLISTER, T.; TOPP, E. Survey of hormone activities in municipal biosolids and animal manures. En: Environmental Toxicoly. 2004, (19):216–225.
NELSON, James. Screening of endocrine disrupting compounds using estrogen receptor transcriptional activation in vitro bioassay. Burnaby: Symon Fraser University, 2007. (Thesis of Master Science)
OLEA SERRANO, N.; ZULUAGA, A. Exposición infantil a disruptores endocrinos. En: An Esp Pediatr. 2001, 54(1):58-62.
PARROTT, J.L.; BLUNT, B.R. Life-cycle exposure of fathead minnows (Pimephales promelas) to an ethinylestradiol concentration below 1 ng/L reduces egg fertilization success and demasculinizes males. En: Environmental Toxicoly. 2005, 20(2):131-141.
PAWLOWSKI, S.; TERNES, T.; BONERZ, M.; RASTALL, A.; ERDINGER, L.; BRAUNBECK, T. Estrogenicity of solid phase-extracted water samples from two municipal sewage treatment plant effluents and river Rhine water using the yeast estrogen screen. En: Toxicology in Vitro. 2004, 18(1):129-138.
ROUTLEDGE, J.; SUMPTER, J. Estrogenic activity of surfactants and some of their degradation products assessed using a recombinant yeast screen. En: Environmental Toxicology and Chemistry. 1996, 15(3):241-248.
THERMO FISHER SCIENTIFIC. Yeast β galactosidase microplate plate assay protocol (non-stopped). En: THERMO FISHER SCIENTIFIC. Yeast β galactosidase assay kit instructions. Rockford: Pierce Biotechnology, 2010. (Nº 75768)
UNIVERSIDAD DE SALAMANCA. Paquete estadístico Simfit. [En línea]. Salamanca: Universidad de Salamanca, [s.d]. [Consulta junio 2010]. Disponible en: http://simfit.usal.es/
WOLFAND, J.; MARYLAND, B. Active ingredient in oral contraceptives (17alfa-ethinylestradiol) alters male competitive courtship behaviors and secondary sexual characteristics in fathead minnows (Pimephales promelas). En: Journal of the U.S. SJWP. 2007.
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