Desarrollo de superficies modificadas oro - anticuerpo anti-PSPB para su uso como biosensor en la detección de preñez bovina
DOI:
https://doi.org/10.26461/05.04Resumo
En este trabajo se presentan los resultados preliminares para el desarrollo de un biosensor amperométrico destinado a la cuantificación de Proteína B Específica de la Preñez (PSPB) en fluidos biológicos como medio de diagnóstico clínico precoz de la preñez bovina. A la superficie de oro modificada con ácido mercaptoundecanoico (MUA) se fijaron anticuerpos anti-PSPB y peroxidasa de rábano (HRP). Se verificó la inmovilización de las biomoléculas mediante voltamperometría cíclica y medida del ángulo de contacto.Se estudió el comportamiento electroquímico del electrodo desarrollado por medio de voltamperometría cíclica y medidas a potencial constante, estableciendo la relación entre el cambio de corriente catódica (al potencial de reducción de la quinona) y la concentración de PSPB. Esta relación se ve afectada por la formación de complejos antígeno – anticuerpo que limitan el acceso del sustrato al sitio activo de la enzima, provocando una disminución en la señal eléctrica.El electrodo modificado de oro - anti-PSPB – HRP respondió de forma inversamente proporcional a la concentración de PSPB a un potencial de -200 mV (contra electrodo de referencia Ag/AgCl), tanto por voltamperometría cíclica como a potencial constante, y por tanto podría ser la base para el desarrollo de un biosensor amperométrico para detectar precozmente la preñez bovina.
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Referências
CHAKI, N.; VIJAYAMOHANAN, K. Self-assembled monolayers as a tunable platform for biosensor applications. En: Biosensors and Bioelectronics. 2002, 17(1-2):1-12.
DANCZYK, R.; KRIEDER, B.; NORTH, A.; WEBSTER, T.; HOGENESCH, H.; RUNDELL, A. Comparison of antibody functionality using different immobilization methods. En: Biotechnology and Bioengineering. 2003, 84(2):215-223.
DEL VECCHIO, R.; SUTHERLAND, W.; SASSER, R. Effect of pregnancy-specific protein B on luteal cell progesterone, prostaglandin, and oxytocin production during two stages of the bovines estrous cycle. En: Journal of Animals Science. 1995, 73:2662-2668.
EVTUGYN, G.; MINGALEVA, A.; BUDNIKOV, H.; STOIKOVA, E.; VINTER, V.; EREMIN, S. Affinity biosensors based on disposable screen-printed electrodes modified with DNA. En: Analytica Chimica Acta. 2003, 479(2):125-134.
FU, Y.; YUAN, R.; TANG, D.; CHAI, Y. XU, L. Study on the immobilization of anti-IgG on Au-colloid modified gold electrode via. En: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 2005, 40(1):61-66.
GHINDILI, A.; ATANASOV, P.; WIKINS, M. y WIKINS, E. Immunosensors: electrochemical sensing and other engineering approaches. En: Biosensors and Bioelectronics. 1998, 13:113-131.
GILEADI, E. Electrode kinetics for chemists, chemical engineers, and material scientists. New York: VCH Publishers, 1993. ISBN: 0-471-18858-1.
KIRACOFE, G., WRIGHT, J.; SCHALLES, R.; RUDER, C.; PARISH, S. Y SASSER R. Pregnancy-specific protein B in serum of postpartum beef cows. En: Journal of Animal Science. 1993, (71):2199-2205.
LAGES, C. Implementación de la técnica de ángulo de contacto para el estudio de interfases. Montevideo: Facultad de Ciencias, 2006. (Tesis de grado)
MELLO, L.; KUBOTA, L. Review of the use of biosensors as analytical tools in the food and drink industries. En: Food Chemistry. 2002, 77(2):237-256.
MORGAN, C.; NEWMAN, D.; PRICE, C. Immunosensors: technology and opportunities in laboratory medicine. En: Clinical Chemistry. 1996, (42):193-209.
ROPSTAD, E.; JOHANSEN, O.; KING, C.; DAHL, E.; ALBON, S.; LANGVATN, R.; IRVINE, R.; HALVORSEN, O.; SASSER, R. Comparison of plasma progesterone, transrectal ultrasound and pregnancy specific proteins (PSPB) used for pregnancy diagnosis in reindeer. En: Acta Vet. Scand. 1999, 40(2):151-162.
RUDER C.; STELLFLUG, J.; DAHMEN J.; SASSER, R. Detection of pregnancy in sheep of sera for pregnancy-specific protein B. En: Theriogenology. 1988, 29(4):905-911.
SASSER, R.; RUDER, C.; IVANI, K.; BUTLER, J. y HAMILTON W. Detection of pregnancy by radioimmunoassay of a novel pregnancy-specific protein in serum of cows and a profile of serum concentrations during gestation. En: Biology of Reproduction. 1986, 35:936-942.
SCHREIBER, F. Structure and growth of self-assembling monolayers. En: Progress in Surfeces Science. 2000, 65(5):151-256.
SEMAMBO, D.; AYLIFFET, R.; BOYD, J.; Y TAYLOR, D. Ultrasonographic study of early embryonic loss induced by Actinomyces pyogenes in cattle. En: Veterinarian Record. 1992, 131:7-12.
SHAOJUN, D; JINGHONG, L. Self-assembled monolayers of thiols on gold electrodes for bioelectrochemistry and biosensors. En: Bioelectrochemistry and Bioenergetics. 1997, 42(1):7-13.
SUN, T.; FENG, L.; GAO, X.; JIANG, L. Bioinspired surfaces with special wettability. En: Acc. Chemycal. 2005, 38(8):644-352
WANG, M.; WANG, L.; WANG, G.; JI, X.; BIE Y.; LI, T.; GONG, S. Y LI, J. Application of impedance spectroscopy for monitoring colloid Au-enhanced antibody immobilization and antibody-antigen reactions. En: Biosensors and Bioelectronics. 2004, 19(6):575-582.
WANG Z.; VIANA, A.; JIN, G.; ABRANTES, L. Immunosensor interface based on physical and chemical immunoglobulin G adsorption onto mixed self-assembled monolayers. En; Bioelectrochemestry. 2006, 69(2):180-186.
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